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高中教學(xué)儀器動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)與實(shí)施

時(shí)間:2022-08-28 08:01:00 點(diǎn)擊次數(shù):971
 

生物安全相關(guān)法律、法規(guī)、規(guī)范:

《中華人民共和國(guó)傳染病防治法》全國(guó)人大

《生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范》GB50346-2004

《人間傳染的高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)室和實(shí)驗(yàn)活動(dòng)生物安全審批管理辦法》2006.8.15

《人間傳染的病原微生物名錄》2006.1.1

《可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定》2005.12.28

《傳染病病人或疑似傳染病病人尸體解剖查驗(yàn)規(guī)定》2005.4.30

《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》2004.11.12

《衛(wèi)生部、勞動(dòng)和社會(huì)保障部關(guān)于保障接觸病毒或細(xì)菌科研人員醫(yī)療服務(wù)有關(guān)問題的通知》2004.5.9

《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》(GB9489-2004)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)于2004年4月5日審定通過,2004年10月1日正式實(shí)施。2008年修訂,目前實(shí)施的是《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》(GB 9489-2008)

該標(biāo)準(zhǔn)的發(fā)布是我國(guó)實(shí)驗(yàn)室安全管理、公共衛(wèi)生體系建設(shè)以及認(rèn)證認(rèn)可體系建設(shè)具有里程碑意義的一件大事,它標(biāo)志著我國(guó)實(shí)驗(yàn)室生物安全管理和實(shí)驗(yàn)室生物安全認(rèn)可工作步入了科學(xué)、規(guī)范和發(fā)展的新階段。

實(shí)驗(yàn)室生物安全組織體系:

實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人為實(shí)驗(yàn)室生物安全的第一責(zé)任人;實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)當(dāng)任命一名實(shí)驗(yàn)室生物安全負(fù)責(zé)人;指定專人監(jiān)督檢查實(shí)驗(yàn)室技術(shù)規(guī)范和操作規(guī)程的落實(shí)情況。

實(shí)驗(yàn)室生物安全負(fù)責(zé)人應(yīng)為微生物學(xué)家或?qū)I(yè)人員,有基礎(chǔ)物理學(xué)、生物科學(xué)的技術(shù)背景,有與行政、技術(shù)、后勤的有效溝通協(xié)調(diào)。

實(shí)驗(yàn)室生物安全負(fù)責(zé)人的工作:

(1)生物安全、生物安全保障以及技術(shù)規(guī)章方面的咨詢工作。

(2)就技術(shù)方法、程序和方案、生物因子、材料和設(shè)備進(jìn)行定期的內(nèi)部安全檢查。

(3)與有關(guān)人員討論違反生物安全方案或程序的情況。

(4)核實(shí)所有工作人員都接受了適當(dāng)?shù)纳锇踩嘤?xùn)。

(5)進(jìn)行生物安全繼續(xù)教育。

(6)對(duì)于所有牽涉到潛在感染性物質(zhì)或有毒物品泄露等意外事故進(jìn)行調(diào)查,并將調(diào)查結(jié)果以及處理意見向?qū)嶒?yàn)室主任和生物安全委員會(huì)報(bào)告。

(7)就可能的實(shí)驗(yàn)室感染與醫(yī)務(wù)人員進(jìn)行協(xié)調(diào)。

(8)在出現(xiàn)涉及感染性物質(zhì)溢出或其他事故時(shí),要確保清除了污染。

(9)確保廢棄物的正確管理。

(10)確保對(duì)所有設(shè)備在修理或維護(hù)之前已經(jīng)過適當(dāng)?shù)南咎幚怼?/p>

(11)經(jīng)常了解社區(qū)對(duì)衛(wèi)生和環(huán)境問題的態(tài)度。

(12)要根據(jù)國(guó)家規(guī)定,針對(duì)病原體運(yùn)入、運(yùn)出實(shí)驗(yàn)室制訂適當(dāng)?shù)某绦颉?/p>

(13)對(duì)所有涉及感染性物質(zhì)研究工作的計(jì)劃、方案以及操作程序,均要在具體操作實(shí)施以前進(jìn)行生物安全審查。

(14)組織應(yīng)急系統(tǒng)。

實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系文件:

以四層次劃分為例:

安全管理手冊(cè):

對(duì)組織結(jié)構(gòu)、人員崗位及職責(zé)、安全及安保要求、安全管理體系、體系文件架構(gòu)等規(guī)定和描述。

安全要求不能低于國(guó)家和地方的相關(guān)規(guī)定及標(biāo)準(zhǔn)的要求。

應(yīng)明確規(guī)定人員的權(quán)限和責(zé)任,保證遵守安全管理體系要求。

手冊(cè)編制注意事項(xiàng):

強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)室設(shè)立單位的主要負(fù)責(zé)人對(duì)安全管理負(fù)總責(zé);

批準(zhǔn)頁(yè)由設(shè)立單位的主要負(fù)責(zé)人簽發(fā)。

實(shí)驗(yàn)活動(dòng)相關(guān)的全過程:

記錄:提供所完成活動(dòng)的證據(jù)的文件,具可追溯性的文件,驗(yàn)證、預(yù)防措施和糾正措施的證據(jù)。

要求制定記錄管理程序;

明確記錄應(yīng)包含:記錄內(nèi)容、要求、記錄的檔案管理、使用權(quán)限、記錄的安全、保存期限等;

保證記錄的真實(shí)、足夠信息、可追溯性;

記錄的更改規(guī)定及更改人簽字、日期;

記錄存儲(chǔ)方式:紙質(zhì)?電子文檔? 便于查閱、檢索;

記錄存放條件:盜竊?丟失?……

涉及病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全法律法規(guī)與監(jiān)督管理:

法律:中華人民共和國(guó)傳染病防治法。

法規(guī):病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例、醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例。

規(guī)章:傳染性非典型肺炎病毒的毒種保存、使用和感染動(dòng)物模型的暫行管理辦法、傳染性非典型肺炎病毒研究實(shí)驗(yàn)室暫行管理辦法、人間傳染的病原微生物名錄;

標(biāo)準(zhǔn):《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》(GB19489-2008)、《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》(WS233-2002)、《生物安全實(shí)驗(yàn)室建設(shè)技術(shù)規(guī)范》。

地方規(guī)范:上海市病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理實(shí)施細(xì)則、上海市一、二級(jí)病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理規(guī)范。

生物危害程度的分級(jí):

根據(jù)對(duì)個(gè)體和群體的危害性分四級(jí):

Ⅰ級(jí):指危害性最低的病毒、細(xì)菌、真菌和寄生蟲等生物因子;

Ⅱ級(jí):指中等危害的生物因子,多為條件致病菌或機(jī)會(huì)致病菌;

Ⅲ級(jí):指能引起個(gè)體的嚴(yán)重感染,但不易在人群中傳播擴(kuò)散的生物因子;可用抗生素治療;

Ⅳ級(jí):指能引起個(gè)體和群體嚴(yán)重感染,難治療。

病原微生物危害程度分類主要依據(jù):

微生物的致病性:致病性越強(qiáng),導(dǎo)致的疾病越嚴(yán)重,其等級(jí)越高;微生物的傳播方式和宿主范圍。它們可能會(huì)受到當(dāng)?shù)厝巳阂延械拿庖咚?、宿主群體的密度和流動(dòng)、適宜媒介的存在以及環(huán)境衛(wèi)生水平等因素的影響。

當(dāng)?shù)厮邆涞挠行ьA(yù)防措施包括:通過接種疫苗或給予抗血清的預(yù)防(被動(dòng)免疫);衛(wèi)生措施,例如食品和飲水的衛(wèi)生;動(dòng)物宿主或節(jié)肢動(dòng)物媒介的控制。

當(dāng)?shù)厮邆涞挠行е委煷胧┌ǎ罕粍?dòng)免疫、暴露后接種疫苗以及使用抗生素、抗病毒藥物和化學(xué)治療藥物,還應(yīng)考慮出現(xiàn)耐藥菌株的可能性。

臨床微生物實(shí)驗(yàn)室及免疫學(xué)病原體篩檢的防護(hù)標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)該是:

涉及動(dòng)物的病原微生物實(shí)驗(yàn):

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室涉及病原微生物,需要考慮的因素包括:正常傳播途徑,使用的容量和濃度,接種途徑,能否和以何種途徑被排出。關(guān)于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室中使用的動(dòng)物,需要考慮的因素包括:動(dòng)物的自然特性,亦即動(dòng)物的攻擊性和抓咬傾向性,自然存在的體內(nèi)外寄生蟲,易感的動(dòng)物疾病,播散過敏原的可能性等。對(duì)使用野外捕捉的野生動(dòng)物應(yīng)考慮潛伏感染的可能性。

危險(xiǎn)物品共分為九大類:

標(biāo)準(zhǔn)的BSL-2實(shí)驗(yàn)室除了滿足BSL-1的要求以外,在門上增加了生物危險(xiǎn)標(biāo)志、II級(jí)生物安全柜。按國(guó)標(biāo)(GB19489-2008),還要配備高壓蒸汽滅菌器、洗眼器。

BSL-1 實(shí)驗(yàn)室:無特殊要求;

BSL-2 實(shí)驗(yàn)室:配備高壓滅菌設(shè)備,著專用工作服,帶乳膠手套,生物安全柜(A2級(jí))內(nèi)操作。

BSL-2:必須強(qiáng)調(diào)對(duì)污染的針頭或利器的使用要非常謹(jǐn)慎。

對(duì)易于通過氣溶膠途徑傳播的微生物、具有增加工作人員暴露氣溶膠或高度飛濺物的程序。

二級(jí)生物安全防護(hù)水平微生物操作必需在一級(jí)生物安全防護(hù)水平的基礎(chǔ)之上,增加生物安全柜、高壓滅菌器、安全離心機(jī)罩帽、防濺罩或面罩等。

實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)的基本原則:

安全設(shè)備和個(gè)體防護(hù);實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)與建造的特殊要求;

安全操作規(guī)程;致病微生物及其毒素在實(shí)驗(yàn)室之間的傳遞;

管理制度;微生物危害評(píng)估。

實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理:

1)有內(nèi)務(wù)管理的政策和程序,包括內(nèi)務(wù)工作所用清潔劑和消毒滅菌劑的選擇、配制、效期、使用方法、有效成分檢測(cè)及消毒滅菌效果監(jiān)測(cè)等政策和程序,應(yīng)評(píng)估和避免消毒滅菌劑本身的風(fēng)險(xiǎn)。

2)不應(yīng)在工作面放置過多的實(shí)驗(yàn)室耗材。

3)應(yīng)時(shí)刻保持工作區(qū)整潔有序。

4)應(yīng)指定專人使用經(jīng)核準(zhǔn)的方法和個(gè)體防護(hù)裝備進(jìn)行內(nèi)務(wù)工作。

5)不應(yīng)混用不同風(fēng)險(xiǎn)區(qū)的內(nèi)務(wù)程序和裝備。

6)應(yīng)在安全處置后對(duì)被污染的區(qū)域和可能被污染的區(qū)域進(jìn)行內(nèi)務(wù)工作。

7)應(yīng)制定日常清潔計(jì)劃和清場(chǎng)消毒滅菌計(jì)劃,實(shí)驗(yàn)室設(shè)備,工作表面。

8)指定專人監(jiān)督內(nèi)務(wù)工作,定期評(píng)價(jià)。

9)實(shí)驗(yàn)室的內(nèi)務(wù)規(guī)程和所用材料發(fā)生改變時(shí)通知實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人。

10)實(shí)驗(yàn)室規(guī)程、工作習(xí)慣或材料的改變可能對(duì)內(nèi)務(wù)人員有潛在危險(xiǎn)時(shí),通知實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人并書面告知內(nèi)務(wù)管理負(fù)責(zé)人。

11)發(fā)生危險(xiǎn)材料溢灑時(shí),啟用應(yīng)急處理程序。

12) 相關(guān)記錄安全保存。

實(shí)驗(yàn)室操作與技術(shù):

工作時(shí)進(jìn)出受約束或受限制;禁止吃、喝、吸煙;禁止用口移液;將濺灑和氣溶膠減到最少;每天對(duì)工作面消毒;將廢物消毒;保持對(duì)昆蟲和嚙齒類動(dòng)物的控制。

入實(shí)驗(yàn)室:門禁,更衣,填寫準(zhǔn)出入實(shí)驗(yàn)室表。

查看實(shí)驗(yàn)室:儀器,試劑,標(biāo)本,填寫使用記錄。

操作:防漏,防氣溶膠,自身保護(hù),遵守SOP。

廢棄物處理:廢物桶,廢物袋,高壓(指示物),登記。

出實(shí)驗(yàn)室:更衣,清潔,消毒,填寫出入實(shí)驗(yàn)室表。

標(biāo)識(shí)系統(tǒng):

設(shè)置原則:安全、明確、醒目、便利、通用。

標(biāo)識(shí)系統(tǒng)分四大類:警告標(biāo)識(shí)、禁止標(biāo)識(shí)、指令標(biāo)識(shí)、提示標(biāo)識(shí)。

用于標(biāo)示危險(xiǎn)區(qū)、警示、指示、證明等的圖文標(biāo)識(shí)是管理體系文件的一部分臨時(shí)標(biāo)識(shí),如污染、消毒中、設(shè)備檢修等。

標(biāo)示出危險(xiǎn)區(qū),且應(yīng)適用于相關(guān)的危險(xiǎn)。

同時(shí)使用標(biāo)識(shí)和物理屏障標(biāo)示出危險(xiǎn)區(qū)。

標(biāo)示具體的危險(xiǎn)材料、危險(xiǎn)。

包括:生物危險(xiǎn)、有毒有害、腐蝕性、輻射、刺傷、電擊、易燃、易爆、高溫、低溫、強(qiáng)光、振動(dòng)、噪聲、動(dòng)物咬傷、砸傷等;

同時(shí)提示必要的防護(hù)措施。

注明設(shè)備的可用狀態(tài)、驗(yàn)證周期、下次驗(yàn)證或校準(zhǔn)的時(shí)間等信息。

實(shí)驗(yàn)室入口處應(yīng)有標(biāo)識(shí)。

明確說明生物防護(hù)級(jí)別、操作的致病性生物因子、實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人姓名、緊急聯(lián)絡(luò)方式和國(guó)際通用的生物危險(xiǎn)符號(hào);適用時(shí),應(yīng)同時(shí)注明其他危險(xiǎn)。

實(shí)驗(yàn)室所有房間的出口和緊急撤離路線有指示。

在無照明的情況下也可清楚識(shí)別的標(biāo)識(shí)。

所有管道和線路應(yīng)有明確、醒目和易區(qū)分的標(biāo)識(shí)。

所有操作開關(guān)應(yīng)有明確的功能指示標(biāo)識(shí)。

采取防止誤操作或惡意操作的措施。

定期(至少每12個(gè)月一次)評(píng)審實(shí)驗(yàn)室標(biāo)識(shí)系統(tǒng)。

及時(shí)更新,以確保其適用現(xiàn)有的危險(xiǎn)。

國(guó)際生物危害警告標(biāo)志:

生物安全實(shí)驗(yàn)室廢物處置:

有危險(xiǎn)廢物處置程序,包括對(duì)排放標(biāo)準(zhǔn)及監(jiān)測(cè)規(guī)定。

評(píng)估和避免危險(xiǎn)廢物處理和處置風(fēng)險(xiǎn)。

按相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)分類處理和處置廢物。

危險(xiǎn)廢物棄置于專門設(shè)計(jì)的、專用的和有標(biāo)識(shí)容器內(nèi)。

銳器(包括針頭、小刀、金屬和玻璃等)應(yīng)直接棄置于耐扎的容器內(nèi)。

由經(jīng)過培訓(xùn)的人員處理危險(xiǎn)廢物,并應(yīng)穿戴適當(dāng)?shù)膫€(gè)體防護(hù)裝備。

應(yīng)存放在指定的安全地方。

在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)消毒滅菌含活性高致病性生物因子的廢物。

廢棄物處理高壓蒸汽滅菌器:

下排氣滅菌器的裝載量不得超過柜室內(nèi)容量的80% ;預(yù)真空滅菌器的裝載量不得超過柜室容積90%,且不得小于柜室容積的10%和5%。

必須將不同類物品裝放在一起,則以最難達(dá)到滅菌物品所需的溫度和時(shí)間為準(zhǔn)。

物品裝放時(shí),上下左右相互間均應(yīng)間隔一定距離以利蒸汽置換空氣。

安全檢查:

設(shè)施設(shè)備的功能和狀態(tài)正常;

警報(bào)系統(tǒng)的功能和狀態(tài)正常;

應(yīng)急裝備的功能及狀態(tài)正常;

消防裝備的功能及狀態(tài)正常;

危險(xiǎn)物品的使用及存放安全;

廢物處理及處置的安全;

人員能力及健康狀態(tài)符合工作要求;

安全計(jì)劃實(shí)施正常;

實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)的運(yùn)行狀態(tài)正常;

不符合規(guī)定的工作及時(shí)得到糾正;

所需資源滿足工作要求。

應(yīng)急措施:

制定應(yīng)急措施的政策和程序,包括:

生物性、化學(xué)性、物理性、放射性等緊急情況;

火災(zāi)、水災(zāi)、冰凍、地震、人為破壞等任何意外緊急情況;

保證使留下的空建筑物處于盡可能安全狀態(tài)的措施;

應(yīng)急程序至少包括:

負(fù)責(zé)人、組織、應(yīng)急通訊;報(bào)告內(nèi)容;個(gè)體防護(hù)和應(yīng)對(duì)程序;應(yīng)急設(shè)備;撤離計(jì)劃和路線;污染源隔離和消毒滅菌;人員隔離和救治;現(xiàn)場(chǎng)隔離和控制;風(fēng)險(xiǎn)溝通。

使所有人員(包括來訪者)熟悉:應(yīng)急行動(dòng)計(jì)劃;撤離路線;緊急撤離的集合地點(diǎn)。

每年應(yīng)至少組織所有實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)行一次演習(xí)。

評(píng)估與演練:確保應(yīng)急措施的針對(duì)性、科學(xué)性、持續(xù)有效性和充分性。

1級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室溢出處理:

通知在這一區(qū)域的其他人預(yù)防污染。

穿戴手套、實(shí)驗(yàn)衣和面罩,用紙巾覆蓋溢出物,把濃縮的消毒劑倒在溢出物區(qū)域周圍并與溢出物混和,并維持適當(dāng)?shù)慕佑|時(shí)間。

用鑷子撿起一些玻璃碎片并放在生物危害高壓滅菌袋內(nèi)待凈化后丟棄。

用皂液和消毒洗手液洗手。

II級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室溢出:

迅速離開房間,避免吸入經(jīng)空氣傳播的物質(zhì)。通知其他的人離開。

關(guān)門并貼上警告標(biāo)簽。

移去污染的衣物,放在生物危害袋內(nèi)。

用肥皂和水清洗所有暴露的皮膚。

報(bào)告轉(zhuǎn)化所生物安全負(fù)責(zé)人,如果需要幫助,請(qǐng)咨詢生物安全委員會(huì)。

在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室所前,使氣溶膠彌散至少30分鐘。備齊處理物(消毒劑,紙巾,生物危害袋和鑷子)。

穿上防護(hù)衣(實(shí)驗(yàn)外套,面罩,實(shí)驗(yàn)手套,必要時(shí)穿上長(zhǎng)統(tǒng)靴)。按溢出物的狀態(tài),可以戴一個(gè)HEPA過濾呼吸罩以代替外科面罩。

用消毒濕巾覆蓋污染區(qū)域,然后,小心地倒上消毒劑在溢出物的周圍。避免擴(kuò)大污染區(qū)域。因?yàn)橐灰绯鑫锵♂屗砸酶鼭饪s的消毒劑。允許至少20分鐘的接觸反應(yīng)時(shí)間。

用鑷子撿起一些尖銳的物品丟棄在一個(gè)尖銳物存放器皿內(nèi),用消毒劑浸泡。

用消毒劑擦凈溢出物可能飛濺到的周圍區(qū)域。

用消毒劑浸泡溢出物,并放在一個(gè)生物危害袋內(nèi)。

用10%家用漂白液噴霧這個(gè)區(qū)域和并空氣干燥,或在接觸反應(yīng)10分鐘后用消毒濕巾擦掉。

用消毒劑或抗菌皂和水清洗手和暴露的皮膚部分。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的護(hù)理和使用原則:

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)和使用應(yīng)遵守國(guó)家相關(guān)法律和規(guī)定

應(yīng)明確使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的理由和目的

明確實(shí)驗(yàn)所使用動(dòng)物的種類和數(shù)量,動(dòng)物的數(shù)量應(yīng)滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)的要求。

完善操作規(guī)程,避免或減輕因?qū)嶒?yàn)對(duì)動(dòng)物造成的不適和痛苦。包括使用適當(dāng)?shù)逆?zhèn)靜、鎮(zhèn)痛或麻醉方法;禁止不必要的重復(fù)操作。

嚴(yán)格按程序?qū)嵤?shí)驗(yàn)后動(dòng)物的處理,包括麻醉、止痛、實(shí)驗(yàn)后的護(hù)理或用麻醉方法處死。

實(shí)驗(yàn)過程中要求保證實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的良好生活條件,包括飼養(yǎng)環(huán)境、符合需求的飼料及細(xì)心的護(hù)理等。

研究人員和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物操作人員應(yīng)接受實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的基本知識(shí)和操作技能等方面的培訓(xùn)。

使用過程中要求保證周圍環(huán)境和實(shí)驗(yàn)人員的安全。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過程的行為規(guī)范:

1.物理限制:指在實(shí)驗(yàn)過程中包括檢查、收集標(biāo)本、給藥、治療或?qū)嶒?yàn)操作等,用手或工具限制動(dòng)物活動(dòng)的過程。

物理限制的主要原則和要求:

限制的工具不能作為常規(guī)的飼養(yǎng)工具。

工具的設(shè)計(jì)應(yīng)合理,不要僅考慮實(shí)驗(yàn)的便利,主要考慮盡量減少動(dòng)物的不適,避免傷害。

盡量減少限制的時(shí)間,以達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康臑榛鶞?zhǔn)。

在限制過程中,如果發(fā)生損傷或嚴(yán)重的行為改變,應(yīng)暫?;蚪瓜拗?,并給予處理或治療。

保證實(shí)驗(yàn)人員和周圍人員的安全。

2.手術(shù)操作:有些實(shí)驗(yàn)需要對(duì)動(dòng)物進(jìn)行手術(shù),即打開或刺穿動(dòng)物的身體,對(duì)動(dòng)物的身體或生理機(jī)能產(chǎn)生較大的損害,同時(shí),實(shí)驗(yàn)人員也容易被血液/體液污染或被器械、針頭刺傷,存在潛在生物污染的威脅,因此必須做到。

操作一定要使用適當(dāng)?shù)逆?zhèn)靜、鎮(zhèn)痛或麻醉方法。

禁止不必要的重復(fù)操作。

不提倡利用一個(gè)動(dòng)物進(jìn)行多個(gè)手術(shù)實(shí)驗(yàn),但是,為充分利用動(dòng)物資源,經(jīng)動(dòng)物倫理委員會(huì)許可,在可能的條件下可以實(shí)施。

嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程,防止發(fā)生血液/體液外濺和針刺傷,避免生物污染。

手術(shù)后的動(dòng)物、標(biāo)本以及所用器具材料等必須按規(guī)定程序妥善處置。

3.飲食的限制:

實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物原則上要求隨時(shí)飲食,如果一些實(shí)驗(yàn)需要?jiǎng)游锵拗剖澄锘蛩臄z入量,應(yīng)保證動(dòng)物存活所需要的最低需求量。

4.廢棄物和尸體處理:

1)血液和體液標(biāo)本的處理

用于抗體、抗原、病原微生物、生化指標(biāo)等檢查的血液和體液,按照要求進(jìn)行處理并檢測(cè),檢測(cè)后的標(biāo)本經(jīng)121℃,30min高壓消毒處理。

2)動(dòng)物臟器組織的處理

動(dòng)物器官組織,尤其是用于病原微生物分離的組織按照標(biāo)準(zhǔn)程序進(jìn)行處理;用于病理切片的組織,均需要經(jīng)過甲醛固定后再進(jìn)行切片。剩余的組織經(jīng)121℃,30min高壓消毒處理。

3)動(dòng)物尸體的處理

安樂處死后的動(dòng)物尸體,取材完畢后,經(jīng)121℃,30min高壓滅菌處理后,集中送環(huán)保部門處理。動(dòng)物生物安全三級(jí)(ABSL-3)實(shí)驗(yàn)室及以上級(jí)的實(shí)驗(yàn)室的感染動(dòng)物尸體需經(jīng)室內(nèi)和雙扉兩道高壓滅菌,才能移出實(shí)驗(yàn)室。

4)動(dòng)物咽拭子的處理

用于病原分離和PCR檢測(cè)的咽拭子,按照各自的要求處理后,進(jìn)行病毒分離和PCR檢測(cè),剩余的標(biāo)本經(jīng)121℃,30min高壓消毒處理。

5)病原分離培養(yǎng)物的處理

病原分離的培養(yǎng)物,不論是陽(yáng)性還是陰性結(jié)果,均需經(jīng)121℃,30min高壓消毒處理。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用程序和要求:

實(shí)驗(yàn)室如需要使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,應(yīng)首先向生物安全和倫理委員會(huì)提出申請(qǐng),填寫申請(qǐng)表。

使用實(shí)驗(yàn)室得到認(rèn)可后,根據(jù)申請(qǐng)表中申請(qǐng)的動(dòng)物種屬和數(shù)量,安排實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)和使用。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必須在指定的區(qū)域內(nèi)飼養(yǎng)和使用,禁止在實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)操作結(jié)束時(shí),動(dòng)物須返回指定的飼養(yǎng)區(qū)域內(nèi),不能在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)過夜。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)指定的區(qū)域進(jìn)行。

含有感染性材料的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)要求:

涉及感染性材料的操作要在生物安全柜中進(jìn)行,并防止泄露在安全柜底面。操作包括感染動(dòng)物的解剖、組織的取材、采血及動(dòng)物的病原接種。

動(dòng)物籠具在清洗前先做消毒處理。

污物、一次性物品需放入醫(yī)療廢物專用垃圾袋中,經(jīng)高壓滅菌后方可拿出實(shí)驗(yàn)室。

動(dòng)物尸體用雙層醫(yī)療廢物專用垃圾袋包裹后,放入標(biāo)有動(dòng)物尸體專用的容器中,用消毒液噴霧容器表面后,運(yùn)至解剖區(qū)域剖檢。

生物安全柜使用后應(yīng)用消毒液擦拭、揩干。

廢液需按比例倒入有消毒液的桶中,倒入時(shí)需沿容器壁輕倒并戴眼罩,防止濺入眼中。

如果有感染性物質(zhì)濺到生物安全柜上、地上以及其他地方,應(yīng)按菌,毒外溢在臺(tái)面、地面和其他表面處理。

每天工作結(jié)束時(shí),應(yīng)用消毒液擦拭門把手和地面等表面區(qū)域。

廢物放入高壓滅菌器內(nèi)時(shí)需同時(shí)粘貼指示條,物品移出前觀察指示條是否達(dá)到滅菌要求。顏色不符時(shí)需重復(fù)高壓滅菌。

高壓滅菌器需每月做滅菌測(cè)試一次,并作記錄。

小動(dòng)物的飼養(yǎng):

小動(dòng)物主要指小鼠、大鼠、豚鼠等嚙齒類動(dòng)物,其飼養(yǎng)應(yīng)遵循下列原則:

使用動(dòng)物必須按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或?qū)嶒?yàn)特殊要求檢驗(yàn)合格,充分準(zhǔn)備后進(jìn)入系統(tǒng),飼養(yǎng)人員應(yīng)按實(shí)驗(yàn)設(shè)施規(guī)定程序要求進(jìn)入系統(tǒng)。

及時(shí)觀察動(dòng)物飲食、精神狀況,有無異常表現(xiàn),患病或死亡。

動(dòng)物應(yīng)可自由進(jìn)食、飲水。定期檢查水、料是否充足并及時(shí)補(bǔ)給。同時(shí)保證其他飼養(yǎng)條件完備。

大動(dòng)物飼養(yǎng):

大動(dòng)物主要指狗、豬及非人類靈長(zhǎng)類動(dòng)物等。

使用動(dòng)物必須按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或?qū)嶒?yàn)特殊要求,檢驗(yàn)合格,充分準(zhǔn)備后方可進(jìn)入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室。

應(yīng)將每只動(dòng)物日攝取總量分批次喂給,以保證動(dòng)物的進(jìn)食量和減少浪費(fèi)。

應(yīng)經(jīng)常檢查飲水裝置,及時(shí)補(bǔ)充不足。

動(dòng)物飼養(yǎng)區(qū)域應(yīng)每天打掃,保持清潔,每周將地面消毒三次。

喂給瓜果、蔬菜等須洗凈消毒。禁止喂給腐爛發(fā)霉不潔的食物,飲水要清潔。

對(duì)飼喂動(dòng)物所用的小推車、食物、水容器等用品每周進(jìn)行兩次消毒。

室內(nèi)光照,要求明暗各12h自動(dòng)交替。

動(dòng)物的檢疫:

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)入檢疫室 在檢疫室的緩沖間內(nèi),用75%酒精噴灑動(dòng)物的外包裝進(jìn)行消毒,打開紫外燈照射10~15min。

將經(jīng)上述處理的動(dòng)物移入檢疫室,根據(jù)要求進(jìn)行檢疫。

各動(dòng)物的檢疫期不同,大動(dòng)物為2周,小動(dòng)物為1周。

在檢疫期內(nèi)觀察動(dòng)物的精神狀態(tài)、食欲、營(yíng)養(yǎng)狀況、排泄物等,如有任何異常,動(dòng)物不得用于實(shí)驗(yàn),應(yīng)退出動(dòng)物檢疫室。

檢疫合格的動(dòng)物經(jīng)適當(dāng)處理后由緩沖間或物流通道進(jìn)入動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的有關(guān)操作:

1.給藥:根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,按不同的動(dòng)物,不同途徑給藥。灌胃和靜脈注射。對(duì)接種了高致病性病原微生物的動(dòng)物,尤其是大動(dòng)物,將動(dòng)物麻醉后方可進(jìn)行灌胃或靜脈注射。小動(dòng)物灌胃或靜脈注射可根據(jù)情況選擇是否麻醉,靜脈注射時(shí)需使用固定器。

2.采樣:原則上活檢時(shí)應(yīng)對(duì)動(dòng)物進(jìn)行麻醉。對(duì)接種了病原體的大動(dòng)物進(jìn)行采血或體檢時(shí),要求將動(dòng)物麻醉。對(duì)小動(dòng)物進(jìn)行灌胃、注射和采血時(shí),可不麻醉動(dòng)物,但要防止動(dòng)物咬抓。

動(dòng)物生物安全實(shí)驗(yàn)室設(shè)施與防護(hù)要求:

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施依其使用功能的不同,劃分為各個(gè)功能區(qū)域,各自有不同的要求。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境設(shè)施分為三等,控制程度從低到高,依次為開放環(huán)境、隔離環(huán)境和屏障環(huán)境。

普通動(dòng)物設(shè)施的區(qū)別:

動(dòng)物房的建筑要求是避免外界微生物感染飼養(yǎng)的清潔級(jí)或SPF級(jí)動(dòng)物,所以空氣是外排的,而動(dòng)物是清潔的。此時(shí),進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的工作人員反而可能作為傳染源感染動(dòng)物。

生物安全實(shí)驗(yàn)室的建筑理念則與之相反,在BSL-3實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的動(dòng)物是不安全因素,要避免動(dòng)物及其排泄物污染外界環(huán)境,所以BSL-3實(shí)驗(yàn)室內(nèi)是負(fù)壓,空氣是向內(nèi)流的。

動(dòng)物設(shè)施的防護(hù)水平的實(shí)驗(yàn)操作和安全設(shè)備匯總:

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